T4 Polynukleotid Kinase
| Katalog-Nr: | Menge | Preis, Euro | SHOP |
| 403005 | 500 u | 30,00 | Add to cart |
| 402010 | 2500 u | 120,00 | Add to cart |
Datasheet: T4 Polynucleotide Kinase
Beschreibung:
T4 Polynukleotidkinase katalysiert den Transfer von Phosphat von die Gammaposition des ATP zum 5' Hydroxyende von Polynukleotiden (DNA und RNA) oder auch zu Nukleosid-3'-Monophosphat. Das Enzym wird für die Endmarkierung von DNA und RNA für DNA-Sequenzierung und für die Phosphorylierung von 5'-Hydroxy-DNA Fragmenten zur anschließenden Ligation benutzt. Zur kompletten nichtradioaktiven Phosphorylierung von 5'-Hydroxyenden wird ein mehr als 2-facher Überschuß an ATP (100 µM) eingesetzt. Die T4 Polynukleotidkinase Kinase Aktivität ist sehr anfällig gegen Salzzusätze: 150 mM NaCl inhibiert zu mehr als 50%. Da auch schon 10 mM Ammoniumsulfat (manchmal ein Zusatz bei der PCR) zu mehr als 80% inhibiert, ist es ratsam vor der weiteren Verwendung der DNA diese durch Präzipitation zu reinigen.
Reaktionspuffer (10x):
100 mM Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM MgCl2, 50 mM DTT.
Qualität:
Frei von: Endo- und Exonuklease, Phophatase und RNase Aktivitäten
Konzentration:
5000 units/ml
Einheitendefinition:
Eine Einheit des Enymes katalysiert den Transfer von 1 nmol von Phospatase in 30 Min bei 37°C.
Lagerpuffer:
50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.4), 0.1 mM EDTA, 1 mM dithiothreitol, 0.1 µM ATP and 50% Glyzerin
Lagerung:
-20°C
