"Real time" PCR - die Spezialität von Bioron

"Hot Start" PCR

Die Vorteile der "Hot-start PCR-Methode" lassen sich kurz zusammenfassen:

• Es reichern sich weniger oder keine Artefakte an.
• Die Polymerase-Ketten-Reaktion beginnt in allen Ansätzen simultan, erst wenn die DNA vollständig aufgeschmolzen ist.
• Die Polymerisation beginnt erst, wenn die Primer auf Grund der Temperatur spezifisch an die DNA binden.
• Die Primer-Konzentration wird nicht durch eine Dimerisierung der Primer verringert.
• Das vorhandene PCR Protokoll muss beim Einsatz von Antikörper-inhibierten DNA Polymerase nicht verändert werden

Bioron bietet Ihnen eine „Hot-Start“ Polymerasen sowie Mastermixe für die Hot-Start PCR bei denen durch den Einsatz von Antikörpern, die an die Polymerase (Taq DNA Polymerase) gebunden sind, die Aktivität der Polymerase bei Raumtemperatur gehemmt wird.
Die Antikörper aktivieren die Polymerase Reaktion erst bei einer Temperatur (> ca. 72 °C), bei der die Primer spezifisch and die DNA gebunden werden.

Einen Nachteil hat auch die o.g. Hot-start PCR Methode. Die Reagenzien und/oder die Mastermixe sollen bei längerer Lagerung bei – 20°C gelagert werden. Daneben wird ein häufiges auftauen und einfrieren nicht empfohlen.
Auch hierfür entwickelte Bioron eine Lösung: Gefriergetrocknete „Hot-start“ Mastermixe die bei Raumtemperatur oder bei 4°C über eine lange Zeit gelagert werden können.

Diese einmalige Methode wurde durch ein Sortiment für die PCR-Diagnostik (Basis: Agarose –Gele) komplettiert.

Gefriergetrocknete Mastermixe für die PCR-Diagnostik