DFS-Taq DNA Polymerase
BESONDERE EMPFEHLUNG:
FÜR ARBEITEN MIT BAKTERIELLER DNA
z. B. 16S-PCR zur Bakterienidentifizierung
| Katalog-Nr: | Konz. | Menge | Preis, Euro | SHOP |
| 101005 | 5,0u/µl | 500 u | 99,00 | Add to cart |
| 101025 | 5,0u/µl | 2500 u | 399,00 | Add to cart |
| 101100 | 5,0u/µl | 10000 u | 1200,00 | Add to cart |
| 101500 | 5,0u/µl | 50000 u | 4000,00 | Add to cart |
1 - DFS Taq E.coli DNA (Test) 
2 - with adding E.coli DNA (control)
Datenblatt DFS Taq DNA Polymerase Download: Tests and Produkt-Info (DFS-Taq)
Protokoll für DFS-Taq DNA Polymerase
Beschreibung
Die DFS-Taq DNA-Polymerase ist ein temperaturstabiles Enzym mit einem Molekulargewicht von ca. 94 kDa, aus dem Eubakterium Thermus aquaticus Klon YT-1 (1). Dieses unmodifizierte Enzym erreicht seine höchste Prozessivität bei 72°C. Es katalysiert die Polymerisierung von Nukleotiden in Duplex-DNA in der 5' → 3'-Richtung in Anwesenheit von Magnesiumionen. Außerdem besitzt es eine 5' → 3'-Exonukleaseaktivität. Das Enzym ist hochrein, frei von unspezifischen Endo- und Exonukleasen und bakterieller DNA. DFS-Taq DNA Polymerase fügt zusätzlich 3'-dA Nukleotidüberhänge an die Replikationsprodukte an, sodass diese für das Klonieren in T/ A – Vektoren geeignet sind.
Anwendungsbereich
Sensitive PCR-Anwendungen. Einbau modifizierter Nukleotide. Primer extension reaction. Die DFS-Taq DNA Polymerase ist frei von bakterieller DNA und daher besonders für PCR von 16S RNA-DNA Fragmenten, geeignet. Nur die DFS-Taq ermöglicht Ihnen eine echte negativ-Kontrolle für den Nachweis von bakterieller DNA.
Qualitätskontrolle
Die Taq DNA Polymerase erlaubt die Amplifikation von DNA Fragmenten bis zu einer Länge von 5 kb. Das Enzym wurde getestet auf die Abwesenheit von Endo- und Exonuklease- Aktivität. Jede Charge wird sorgfältig per Real-time PCR mit den Komplementär-Primern zu den 16S ribosomalen Genen auf Verunreinigungen mit bakterieller DNA getestet.
Die folgenden Tests werden mit jeder Lot-Nummer von DFS Taq DNA Polymerase durchgeführt:
- PCR mit verschiedenen Templates- genomische DNA von Mensch und Rind, Phagen
Lambda DNA
- Tests auf Kontamination mit Endo- und Exonukleasen
- “no primers” Test mit Lambda DNA - PCR ohne Primer
- “no template” Test mit Primern aus der konservierten Region bakterieller 16S r- DNA
- Lagerungstest ( 3 Tage bei Raumtemperatur)- keine Änderung der Aktivität
feststellbar
- Sensitivität: unter optimalen Bedingungen sehr gute Ergebnisse ab 6 DNA-Molekülen.
Geeignet für ’single-copy gene’ – PCR aus genomischer menschlicher DNA
Konzentration: 5000 units/ml oder 2500 units/ml (DFS Taq light)
Lagerungspuffer: 10 mM Kaliumphosphat (pH 7,4), 0,1 mM EDTA, 50 % Glycerin, 0,1 % Triton X-100 und 0,1 % Tween 20.
Wir liefern kostenlos zur Polymerase:
Reaktionspuffer rot (10X) 'incomplete’
160 mM (NH4)2SO4, 670 mM Tris • HCl (pH 8,8), 0,1 % Tween 20
Reaktionspuffer gelb (10X) 'complete'
160 mM (NH4)2SO4, 670 mM Tris • HCl (pH 8,8), 0,1 % Tween 20, mit
25 mM MgCl2.
Reaktionspuffer schwarz (x10) "complete" II KCl:
500 mM KCl, 100 mM TrisHCl pH 8.8, 0.1% Tween-20, 15 mM MgCl2
MgCL2 100 mM grün
Lagerbedingungen: Die empfohlene Lagertemperatur beträgt -20°C. Bei Raumtemperatur ist das Enzym für mindestens 3 Tage ohne Aktivitätsverlust stabil.
Einheitendefinition: Eine Einheit ist die Enzymmenge, die bei 72°C in 30 min 10nmol Desoxyribonukleotide in TCA-fällbares, säureunlösliches Material umwandelt.
Reference: 1. Kaledin, A.S., Sliusarenko, A.G. and Gorodetskii, S.I. (1980) Biokhimiya 45, 644(Rus)
