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DFS-Taq Blue

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Anwendungen: DFS Taq-Blue ist für alle gängigen PCRs verwendbar. Für Realtime PCR sollten ungefärbte Polymerasen eingesetzt werden. DFS Taq-Blue ist absolut frei von bakterieller DNA und eignet sich dadurch auch für Projekte mit bakteriellen Templates. Das Enzym ist blau zur visuellen Kontrolle des Reaktionsansatzes.

Beschreibung:<em> </em>DFS-Taq Blue DNA Polymerase ist ein thermoresistentes Enzym von etwa 94 kDa isoliert aus dem Eubakterium Thermus aquaticus Stamm YT-1(1). Dieses unmodifizierte Enzym repliziert DNA bis zu 5 kb Länge bei 72°C und katalysiert die Polymerisation von Nukleotiden zu Doppelstrang-DNA in 5´-->3´ Richtung und 5´-->3´ Exonuklease-Aktivität. Das Enzym ist hochgradig gereinigt und frei von unspezifischen Endo- und Exonukleasen. Taq DNA Polymerase bildet 3'-dA Nukleotid-Überhänge. Das Enzym ist blau zur visuellen Kontrolle des Reaktionsansatzes.

Qualitätskontrolle:
• Lagerungstest ( 7 Tage bei Raumtemperatur) - keine Änderung der Aktivität feststellbar
• Keine Endonuklease- Exonuklease- oder Nickase-Aktivität nachweisbar
• PCR mit verschiedenen Templates - genomische DNA von Mensch und Rind, Phage Lambda DNA
• “no primers” Test mit Lambda DNA - PCR ohne Primer
• “no template” Test mit Primern aus der konservierten  Region bakterieller 16S r- DNA

Konzentration: 5000 units/ml
Prozessivität: DFS-Taq Blue DNA Polymerase polymerisiert effektiv PCR-Produkte bis zu 5 kb.<em>
</em>Sensitivität:<em> </em>Ab 6 Template-Molekülen findet effektive Amplifizierung statt

Unit Definition: Eine Einheit ist die Enzymmenge, die bei 72°C in 30 min 10nmol Desoxyribonukleotide in TCA-fällbares, säureunlösliches Material umwandelt

 


Lagerungspuffer:
10 mM Kaliumphosphat (pH 7,4), 0,1 mM EDTA, 50 % Glycerin, 0,1 % Triton X-100 und 0,1 % Tween 20, Bromphenolblau 0,04%

Reaktionspuffer (x10)” incomplete”: 160 mM (NH4)2SO4, 670 mM TrisHCl pH 8.8, 0.1% Tween-20

Reaktionpuffer (x10) “complete”: 160 mM (NH4)2SO4, 670 mM TrisHCl pH 8.8, 0.1% Tween-20, 25 mM MgCl2

Reaktionspuffer (x10) “complete II KCl”: 500 mM KCl, 100 mM TrisHCl pH 8.8, 0.1% Tween-20, 15 mM MgCl2

Zusätzlich mitgeliefert: 1 Tube MgCl2 (100 mM); empfohlene MgCl2 Konzentration 1,5 – 6 mM

Lagerbedingungen: bei -20°C

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