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Tth DNA Polymerase

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Opens internal link in current windowDeutsches Datenblatt: Tth DNA Polymerase 
user manual: Tth DNA Polymerase

Beschreibung: Tth DNA Polymerase ist die rekombinate Form eines Enzymes das aus dem thermophilen Eubakterium Thermus Termophilus (HB-8) stammt. Das Enzym ist eine hochprozessive 5' - 3' DNA Polymerase die keine 3' - 5' Exonucleaseaktivität zeigt. In Gegenwart von MgCl2 katalysiert Tth DNA Polymerase die Polymerisation von Nukleotiden in Dublex-DNA in 5' - 3' Richtung, doch zeigt die Tth-Polymerase eine sehr hohe intrinsische Reverse Transkriptase Aktivität (RT) in Gegenwart von Mn-Ionen. Die RT-Aktivität ist nicht mit einer RNase H Aktivität verknüpft. Durch Verwendung von Tth-Polymerase, an Stelle einer normalen RT, minimiert Probleme die im Zusammenhang mit Sekundärstrukturen auftreten können, da die reverse Transkription bei höheren Temperaturen durchgeführt werden kann. Tth ist auch bei Temperaturen über 95°C über längere Zeit stabil.

Konzentration: 5000 - 10000 units/ml

Zusammen mit der Polymerase liefern wir kostenlose Reaktionspuffer:

  1. "RT-PCR buffer, one-step reaction"(5 x): 250 mM bicine/KOH, pH 8.2 (25°C); 575 mM K-acetate, 40% Glyzerin (v/v)  
  2. 10 x "Reverse Transkription" Puffer: 100 mM Tris-HCl (pH 8.9 at 25°C), 900 mM KCl  
  3. 10 x Tth PCR Puffer: 100 mM Tris-HCl (pH 8.9 at 25°C), 1M KCl, 500 µg/ml BSA, 0.5% Tween 20  and 15 mM MgCl2  
  4. Mn2+: 1-2 mM für RNA-abhängige cDNA-Synthese (enthalten als MnCl2, als separates Tube)
  5. Mg2+: 3-6 mM für die PCR-Reaktion (enthalten als MgCl2, als separates Tube)

Empfohlene Konzentration an MgCl2: 3 - 6 mM
Lagerung: - 20oC  

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