SuperHot Master Mix
FEEDBACK eines Kunden (Hersteller von diagnostischen PCR Kits): "Mit dem qPCR Master-Mix von Bioron erhalten wir exzelente Ergebnisse bei der Detektion von Mycoplasma DNA. Er wurde nach der Testung von 15 weiteren Master Mixen ausgewählt, weil er höchste Spezifität und Sensitivität zeigt."
| Katalog-Nr: | Menge | Preis, Euro | SHOP |
| 119102 | 100 Reaktionen (2x1,25ml) 3,0 mM MgCl2 | 65,00 | Add to cart |
| 119110 | 500 Reaktionen (10x1,25ml) 3,0 mM MgCl2 | 320,00 | Add to cart |
| 119104 | 100 Reaktionen (2x1,25ml) 7,0 mM MgCl2 | 65,00 | Add to cart |
| 119108 | 500 Reaktionen (10x1,25ml) 7,0 mM MgCl2 | 320,00 | Add to cart |
Ihr Preisvorteil: Unsere Master Mixe sind mit einen PCR-Ansatz von 50 µl berechnet. Sollten Sie Reaktionsansätze mit nur 25 µl durchführen erhalten Sie bei Bioron insgesamt 200 Tests.
Wir bieten vorallem für Kunden, die mit der Methode TaqMan PCR arbeiten denselben Mastermix mit einer höheren Konzentration an, um die Optimierung der PCR-Bedingungen zu erleichtern.
Datasheet: SuperHot Master Mix
Beschreibung: Der 2X PCR Master Mix ist eine fertige Mischung (Ready-to-Use) aus Taq DNA Polymerase (inhibiert von monoklonaren Antikörpern), dNTPs, MgCl2 und Reaktionspuffer bei optimalen Konzentrationen für die effiziente Amplifikation von DNA Templates mittels PCR.
Sie geben nur noch die Primer und die Template DNA dazu. PCR-Mastermix (SuperHOTTMastermix) ist speziell für die Verwendung in der Routine PCR bis 4 kb Amplikonlänge entwickelt. Die spezielle Zusammensetzung des Puffers garantiert reproduzierbare Ergebnisse selbst nach wiederholten Auftau- und Einfrierzyklen.
Der SuperHoT Master Mix ist speziell für den Einsatz in der Real Time PCR entwickelt.
Anwendungsgebiete:
- "schwierige" PCR-Templates bei der andere Polymerasen ungenügende Ergebnisse liefern
- Primer extension
- Multiplex PCR
- Low-copy targets PCR
- Real-time PCR
2x SuperHot PCR Master Mix Zusammensetzung
- Taq DNA Polymerase (rekombinant): 0.1 unit/µl
- Antikörper zu Taq DNA Polymerase, optimiert für eine effektive Inhibierung der Taq DNA Polymerase bei Raumtemperatur
- 32 mM (NH4)2SO4130 mM TrisHCl, pH 8.8 at 25oC
- 0.02% Tween-20
- 3 mM MgCl2 (oder 7,0 mM MgCl2 für die Artikelnummern #119104 und 119108)
(zur Optimierung liefern wir separat eine Stocklösung vom 100 mM MgCl2) - dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP): jeweils 0.4 mM
Performance- und Qualitätstests :
Frei von Endo- und Exodesoxyribunuklease. Getestet in der Amplifikation eines "Single-copy" Gens genomischer Maus DNA.
Endodeoxyribonuklease Test: Nach der Inkubation von 25µl von 2X SuperHot Mastermix mit zirkulärer DNA wurde keine Umwandlung von kovalenter zu "geschnittener" DNA festgestellt. Der Test wurde mit 1 µg von pUC19 DNA in 50µl für 4 Stunden bei 37°C und 70°C durchgeführt.
Assoziierte Reaktionen:
Nach der zweistündigen Inkubation von Lambda DNA, versetzt mit 0,22 mg von EcoR I, bei 72°C mit 18 units des Mastermixes wurden keine endo- und exonuklase Aktivitäten festgestellt.
Lagerung: -20°C
Protokoll:
Durch den inhibierenden Antikörper können alle Schritte bei Raumtemperatur durchgeführt werden
| 50 µl Reaktions Volumen | 25 µl Reaktions Volumen | |||
| Komponent | Volumen | Endkonzentration | Volumen | Endkonzentration |
| 2x PCR Master Mix | 25 µl | 1x | 12.5 µl | 1x |
| Forward Primer | variabel | 0.1-1 µl | variabel | 0.1-1 µl |
| Reverse Primer | variabel | 0.1-1 µl | variabel | 0.1-1 µl |
| Template DNA | variabel | 10 pg-1µg | variabel | 10 pg-1 µg |
| deionisiertes Wasser | bis 50 µl | - | bis 25 µl | - |
- vollständig mischen und zentrifugieren
- den fertigen Mastemix mit Mineralöl oder Wachs "bedecken" wenn kein Cycler mit "heated lid" verwendet wird
- Durchführung der PCR
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