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... entwickelt für die Problemfälle in der PCR (GC-reiche Zielsequenzen) ...

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 Opens internal link in current windowDatasheet: GC-rich PCR DNA Polymerase

Beschreibung: Die GC-rich PCR DNA Polymerase ist eine hochprozessive KOD-Polymerase, die speziell für die Amplifikation von schwierigen Zielseqenzen wie GC-reiche Sequenzen entwickelt wurde.  Als "Proofreading"-Enzym besitzt die GC-rich PCR DNA Polymerase neben einer 5'->3' DNA -Polymeraseaktivität auch eine 3'->5' DNA-Exonucleaseaktivität. Dabei weist dieses Enzym eine vielfach höhere Prozessivität bei minimierter Fehlerrate im Vergleich zur Pfu-Polymerase auf. Eine 5'->3' Exonucleaseaktivität ist nicht vorhanden. Mit der GC-rich PCR DNA Polymerase lassen sich Fragmente von 6 kb Länge amplifizieren. Die generierten PCR-Produkte sind "blunt-ended"

GC-richPfuTaq
Organismus

Thermococcus

kodakaraensis

Pyrococcus furiosus

Thermus

aquaticus

Fehlerrate 0,00350,00390,013

Elongationsrate

(Basen/Sekunde)

106-1362561

Prozessivität

(Nukleotide Base)   

>300<20nicht getestet

Qualitätskontrolle: Dieses Produkt wurde speziell für die fehlerfreie Amplifikation von komplexen GC-reichent DNA-Zielsequenzen entwickelt. Das Enzym ist auf Endo- und Exonucleaseaktivität negativ getestet.

Lagerpuffer:  50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 50 mM KCl; 1 mM DTT; 0.1 mM EDTA; Stabilisatoren; and 50% (v/v) Glyzerin

Reaktionspuffer GC-rich (10x): 1.2 M Tris-HCl (pH 8.0); 100 mM KCl; 60 mM (NH4)2SO4; 1% Triton X-100; 0.01% BSA.  Plus an extra Tube of: 25 mM MgCl2

Lagerbedingungen:  -20°C.

Konzentration: 5 u/µl

Einheitendefinition: Eine Einheit ist die Enzymmenge, die bei 75°C in 30 min 10 nmol Desoxyribonucleotide in TCA-fällbares, säureunlösliches Material umwandelt in einer Reaktion mit 20 mM Tris-HCl (pH 7.5 at 25°C), 8 mM MgCl2, 0,5 mM DTT, 50 µg/ml BSA, je 150 µM  von dATP, dCTP, dGTP, dTTP (eine Mischung aus ungelabelten und [3H]dTTP), und 150 µg/ml aktivierter Kalbsthymus DNA.

 

 

 

 

                                                                                     

 

 

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