dU-HOT Mastermix
dU-HOT Mastermix 2x qPCR
| Katalog-Nr.: | Menge | Preis, Euro | SHOP |
| 119202 | 100 rcs (2x1,25ml) | 65,00 | Add to cart |
| 119210 | 500 rcs (10x1,25ml) | 320,00 | Add to cart |
Beschreibung: Der 2X PCR Master Mix ist eine fertige Mischung (Ready-to-Use) aus Taq DNA Polymerase (inhibiert von monoklonaren Antikörpern), dNTPs, MgCl2 und Reaktionspuffer bei optimalen Konzentrationen für die effiziente Amplifikation von DNA Templates mittels PCR. Das dUTP im Mix dient der Vermeidung von "Carry-over" Kontaminationen in Ihrer Probe durch eine UDG-Behandlung im ersten Schritt.
(Uracil-DNA Glykosylase Katalog-Nr.:111025).
dU-HOT Mastermix ist ready-to-use. Sie geben nur noch die Primer und die Template DNA dazu.
Anwendungsgebiete:
- schwierige PCR-Templates bei der andere Polymerasen ungenügende Ergebnisse liefern
- Primer extension
- Multiplex PCR
- Low-copy targets PCR
Real-time PCR
Komponenten des dU-Hot PCR Master Mix:
- Taq DNA Polymerase (recombinant) in reaction buffer: 0.1 units/µl
- Anti-Taq Antikörper zur effektiven Inhibierung der Polymeraseaktivität bei 37°C
- 32 mM (NH4)2SO4
- 130 mM TrisHCl, pH 8.8 at 25oC
- 0,02% Tween-20
- 3 mM MgCl2
- dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP): (je 0.4 mM)
- dUTP - 0,6 mM
- 1 ml MgCl2 (100 mM)
Performance- und Qualitätstests :
Frei von Endo- und Exodesoxyribunuklease. Getestet in der Amplifikation eines "Single-copy" Gens genomischer Maus DNA.
Endodeoxyribonuklease Test: Nach der Inkubation von 25µl von 2X dU-Hot Mastermix mit zirkulärer DNA wurde keine Umwandlung von kovalenter zu "geschnittener" DNA festgestellt. Der Test wurde mit 1 µg von pUC19 DNA in 50µl für 4 Stunden bei 37°C und 70°C durchgeführt.Protocol for PCR with SuperHot 
PCR Master Mix
Protokoll:
Durch den inhibierenden Antikörper können alle Schritte bei Raumtemperatur durchgeführt werden
| 50 µl Reaktions Volumen | 25 µl Reaktions Volumen | |||
| Komponent | Volumen | Endkonzentration | Volumen | Endkonzentration |
| 2x PCR Master Mix | 25 µl | 1x | 12.5 µl | 1x |
| Forward Primer | variabel | 0.1-1 µl | variabel | 0.1-1 µl |
| Reverse Primer | variabel | 0.1-1 µl | variabel | 0.1-1 µl |
| Template DNA | variabel | 10 pg-1µg | variabel | 10 pg-1 µg |
| deionisiertes Wasser | bis 50 µl | - | bis 25 µl | - |
- vollständig mischen und zentrifugieren
- den fertigen Mastemix mit Mineralöl oder Wachs "bedecken" wenn kein Cycler mit "heated lid" verwendet wird
- Durchführung der PCR
