SSB-HotTaq eignet sich sehr gut für hot-start PCR, qPCR und herkömmliche PCR Anwendungen. SSB-HotTaq minimiert die Formierung von Primer-Dimeren, reduziert das unspezifische Oligonukleotid-Priming und verstärkt damit die spezifische Amplifikation der Zielsequenz. SSB-HotTaq besitzt eine 5´? 3´ Polymeraseaktivität und eine 5´ Flap Endonukleaseaktivität. Die SSB-HotTaq DNA Polymerase ist eine Mischung aus einer thermostabilen Taq DNA Polymerase und einem Einzelstrang bindenden Protein (SSB). Das SSB Protein bindet an die PCR Primer, verhindert eine unspezifische Bindung der Primer und die Amplifikationsaktivität bei niedrigen Temperaturen. Das ermöglicht eine einfaches Ansetzten der PCR Reaktionen bei Raumtemperatur. Das SSB Protein wird durch den anfänglichen Denaturierungsschritt, bei dem die Amplifikationsreaktion auf 94 – 95 °C aufgeheizt wird, denaturiert. Dabei werden die gebundenen Oligonukleotide für das spezifische Priming der Zielsequenzen freigesetzt. Das ermöglicht eine hot-start PCR in der die DNA Polymerase ihren Initationskomplex für die Extension erst nach dem ersten Primer-Annealing-Schritt findet. Die PCR mit SSB-HotTaq kann mit Taq basierende Standard PCR-Zyklenprotokollen durchgeführt werden.

Konzentration

5 units/µl

Einheitendefinition

Eine Einheit wird definiert als die Menge an Enzym die notwendig ist um in 30 Minuten bei 72 °C 10 nmoles dNTP in eine Säure-unlösliche DNA Fraktion zu überführen.

Anwendungen

• qPCR
• hot-start PCR
• Standard PCR

Empfohlene PCR-Bedingungen

Verwenden Sie PCR Konditionen, die für die Taq DNA Polymerase optimiert wurden. Bei geringer Menge an Template sollten zusätzliche Zyklen verwendet werden.

Lagerung

-20°C